Il brodo selenite è un terreno di arricchimento con proprietà selettive progettato per l'isolamento batteri patogeni Genere Salmonella (lat. Salmonella). È molto efficace quando è necessario rilevare questo particolare organismo patogeno tra gli altri rappresentanti della microflora intestinale. Il terreno viene utilizzato sia per la diagnostica clinica che per scopi sanitari durante i test prodotti alimentari.
caratteristiche generali
Il brodo di selenite viene preparato sulla base della polvere, che è una miscela omogenea di vari componenti della composizione. Il colore del materiale secco può essere giallo chiaro o crema, a seconda del tipo di terreno. La polvere ha proprietà di scorrimento libero.
Il brodo di selenite finito è un mezzo liquido trasparente di colore giallo chiaro. Questa massa viene versata in contenitori dove viene effettuata la semina per un'ulteriore incubazione.
Esistono tre tipi principali di brodo di selenite:
- terreno nella sua forma pura - adatto per isolare la Salmonella sia da materiale clinico che sanitario;
- con l'aggiunta di mannitolo (brodo bicomponente) - destinato a lavorare solo con materiale clinico;
- terreno cisteina-selenite - può essere utilizzato per isolare la Salmonella dal biomateriale patologico del paziente (feci, urina, ecc.).
Questi tipi differiscono leggermente nella composizione dei componenti e nelle caratteristiche dell'azione.
Il compito principale del brodo di selenite è promuovere l'accumulo di salmonella, sopprimendo la crescita della microflora associata. Ciò consente non solo di rilevare l'agente patogeno nel materiale, ma anche di trasferirlo successivamente sull'agar. Il terreno è stato sviluppato da Leifler, che per primo ha scoperto l'effetto selettivo della selenite contro la Salmonella.
Composto
Il brodo di selenite contiene:
- idrolizzato di caseina;
- lattosio;
- fosfato di sodio;
- idroselenito di sodio.
Il terreno selenito-cisteina, oltre a questi componenti, contiene L-cisteina e sodio idrogeno fosfato. La composizione del brodo con mannitolo differisce in quanto invece dell'idrolizzato di caseina contiene digerito peptico di tessuto animale. Non c'è lattosio in un ambiente del genere, ma c'è il mannitolo. Quest'ultimo agisce come substrato fermentabile e fornisce le proprietà tamponanti del brodo.
Tutti i componenti della polvere, ad eccezione dell'idroselenito di sodio, sono convenzionalmente chiamati parte A e la sostanza selettiva è chiamata parte B.
Principio di funzionamento e proprietà del mezzo
Il brodo di selenite funziona come mezzo di conservazione selettivo. L'effetto selettivo è assicurato dalla tossicità della selenite, che inibisce la crescita della maggior parte dei microrganismi. Allo stesso tempo, i batteri del genere Salmonella sono in grado di ripristinare questo composto, eliminando così l'effetto tossico per le proprie cellule. Tuttavia, come risultato della reazione, si forma un alcali che riduce l'effetto dannoso della selenite sulla crescita della microflora associata e quindi è necessario stabilizzare il pH. Questa funzione è svolta da batteri che fermentano il lattosio per produrre acido. Il tamponamento del terreno è fornito dal fosfato.
In un brodo bicomponente, il pH è stabilizzato dal mannitolo. I terreni con cisteina migliorano l'azione selettiva contro la Salmonella. Questo brodo è efficace per controllare il contesto infettivo nei pazienti con uno stadio non acuto della malattia o nei convalescenti.
La manifestazione delle caratteristiche di crescita dei ceppi di riferimento nel terreno può essere osservata dopo 12-24 ore dall'inizio dell'incubazione. In questo caso, la salmonella forma colonie incolori.
Caratteristiche di cottura
La preparazione del terreno viene effettuata in due fasi. Innanzitutto, preparare una soluzione con un componente selettivo in ragione di 4 grammi di selenito di sodio per litro di acqua distillata. Quindi aggiungere 19 grammi di polvere base (Parte A). La soluzione viene accuratamente miscelata e riscaldata fino alla completa dissoluzione delle particelle, dopodiché viene versata in provette sterili.
Quando si cucina, è importante tenere d'occhio condizioni di temperatura, poiché l'ambiente è instabile al surriscaldamento. Il brodo può essere sterilizzato solo a bagnomaria o utilizzando un flusso di vapore. È severamente vietato autoclavare il terreno.
Il brodo per l'isolamento degli enterococchi (enterococcosel brodo) è un terreno di arricchimento per l'isolamento degli enterococchi da campioni contenenti numerosa microflora associata. Molti microrganismi, come la Neisseria saprofita, gli stafilococchi, gli haemophilus, gli streptococchi non emolitici e alcuni enterobatteri, vengono inibiti completamente o parzialmente.
La caseina e i peptoni di soia sono fonti di nutrienti necessari per la crescita dei microrganismi. Il destrosio è un carboidrato fermentabile, fonte di carbonio ed energia. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico. Il citrato di sodio è un'ulteriore fonte di carbonio. La sodio azide è un inibitore. Il solfito di sodio, quando ridotto, forma H 2 S. La L-cistina riduce il potenziale redox rimuovendo l'ossigeno, mantenendo un basso valore Eh. Il cristalvioletto è un indicatore di pH.
Inoculare e incubare per 18-24 ore a 35°C in atmosfera normale. La crescita degli enterococchi è determinata dalla formazione di un sedimento granulare sul fondo della provetta, e il liquido sopra di esso è privo di sedimento o leggermente torbido. A questo punto, viene eseguita la colorazione di Gram e lo striscio su piastre di sangue (Trypticasein Soy Agar (Cat. No. 1068) o Blood Agar Base (Cat. No. 1108)) per determinare il tipo di emolisi e isolare le colture pure. Per distinguere tra streptococchi e pneumococchi, posizionare i dischi di bacitracina e optochina sull'area inoculata su piastre di agar sangue e incubare nelle condizioni raccomandate per 18–24 ore a 35±2°C.
Eseguire la colorazione di Gram, il test della catalasi e il test di solubilità biliare su colonie rappresentative prelevate da piastre di agar sangue o da brodo di coltura.
La presenza di catene di cocchi gram-positivi di lunghezza variabile, inibite da basse concentrazioni di bacitracina, negative per la catalasi e insolubili nella bile o nei sali biliari, costituisce un'identificazione preliminare degli streptococchi beta-emolitici di gruppo A. L'identificazione definitiva degli streptococchi può essere ottenuto utilizzando altri test biochimici come l'idrolisi dell'esculina, l'idrolisi del piruvato, ecc. Inoltre, la tipizzazione sierologica può essere eseguita utilizzando i metodi dell'antisiero Lancefield o i più tradizionali metodi di coagglutinazione Edwards e Larson.
Test microbiologico
I seguenti risultati sono stati ottenuti utilizzando il terreno su colture test dopo incubazione a 35±2°C e osservati dopo 18–24 ore.
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Microrganismi |
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Escherichia coli ATCC 25922 |
Inibito |
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Enterococcus faecalis ATCC 19433 |
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Enterococcus faecium ATCC 27270 |
Base per brodo selettivo Bolton -
BoltoneBrodo di arricchimento selettivo (base) per microbiologia
Gatto. N. 1.00068.0500
Confezione - 500 g
Brodo di arricchimento Bolton selettivo per il rilevamentoCampylobacter
Principio operativo
Bolton Selective Broth contiene sostanze nutritive che aiutano a identificare anche le cellule danneggiate di Campylobacter. Non è richiesta la creazione di condizioni microaerofile. L'introduzione di un additivo selettivo nel terreno inibisce la crescita della microflora gram-positiva e gram-negativa associata.
Composizione (g/l)
Peptone di carne 10,0; lattoalbumina idrolisata 5,0; estratto di lievito 5.0; cloruro di sodio 5,0; acido chetoglutarico 1,0; piruvato di sodio 0,5; bisolfito di sodio 0,5; carbonato di sodio 0,6; emina 0,01.
Preparazione
Sciogliere 13,8 g in 500 ml di acqua distillata. Autoclavare per 15 minuti a 121°C e raffreddare a 45°C. Aggiungere in condizioni asettiche 25 ml di sangue di cavallo lisato e il contenuto di 1 flacone di integratore selettivo Boltone Brodo Selettivo Supplemento (Gatto.N 1.00079.0001) al brodo Bolton. Mescolare accuratamente e versare il brodo in bottiglie sterili con tappo a vite. Dopo aver aggiunto il campione, dovrebbero esserci circa 2 cm di spazio tra il tappo a vite e il livello del brodo.
pH 7,4 ±0,2 a 25°C.
Il terreno preparato nel flaconcino è di colore rosso scuro o quasi nero.
Effettuare analisi
Miscelare 25 g di campione in 225 ml di brodo selettivo Bolton e incubare per 4 ore a 37°C.
Proseguire poi l'incubazione alla temperatura di 41,5°C per 14-44 ore.
Subcoltura dopo 18 ore e 48 ore, rispettivamente, su Campylobacter Blood Free Selective Agar (Cat. No. 1.00070.0500), che non contiene sangue.
Proiezione diretta per Campylobacter jejuni E Coli effettuato mediante test rapidi Campylobacter Singlepath®(Cat. n. 1.04143.0001).
Controllo di qualità.
Titolari del brevetto RU 2553224:
Il gruppo di invenzioni riguarda la biotecnologia. Varianti del mezzo nutritivo per l'accumulo selettivo di enterobatteri contengono idrolizzato pancreatico di farina di pesce o peptone di carne oppure idrolizzato pancreatico di farina di pesce e peptone di carne (in rapporto 1:1), bile modificata purificata (PBM), cloruro di sodio, glucosio , fosfato di potassio monosostituito e verde brillante in un dato rapporto. Le invenzioni consentono di aumentare l'efficienza dell'accumulo di enterobatteri, le proprietà selettive del mezzo e semplificare il metodo per ottenere un mezzo nutritivo. 3 n.p. file, 3 tabelle, 9 pr.
L'invenzione riguarda la microbiologia sanitaria e clinica e può essere utilizzata per l'accumulo selettivo di enterobatteri da acqua, prodotti alimentari, materiale clinico, ecc.
Principali aziende estere: Merck “Microbiology”, 2004-2005 p.202; Storia della carne. Il contenuto dei componenti in g/l è presentato nella Tabella 1.
Per il controllo batteriologico secondo la Farmacopea di Stato Federazione Russa, XII edizione, che regola l'elenco dei terreni nutritivi per l'arricchimento selettivo degli enterobatteri, fornisce brodo Mossel (Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel) OFS 42-0067-07.
L'accumulo selettivo di tutti i tipi di enterobatteri nel brodo Mossel è dovuto al fatto che un'alta concentrazione di bile di bue in combinazione con il verde brillante sopprime la crescita della microflora associata e il glucosio favorisce la crescita degli enterobatteri. I fosfati di sodio e potassio forniscono una grande capacità tampone nel terreno, che protegge la coltura dagli effetti dannosi dell'acido risultante.
Fino ad ora, in Russia, a causa della mancanza di un terreno nutritivo secco commerciale domestico per l'arricchimento selettivo degli enterobatteri nella pratica della microbiologia clinica e sanitaria, viene utilizzato il brodo Mossel preparato in laboratorio e per controllare la purezza microbiologica dei terreni medicinali - terreno n. 3 (terreno di arricchimento per batteri della famiglia delle Enterobacteriaceae).
Gli svantaggi del brodo Mossel preparato in laboratorio secondo la ricetta presentata nel Fondo Globale, XII edizione e terreno n. 3 sono:
Difficoltà di preparazione;
L'uso della bile bovina non purificata come fattore selettivo - una sostanza dalla composizione chimicamente incerta che rende difficile ottenere risultati oggettivi;
Mancanza di preparati domestici secchi - peptone e bile, che hanno un alto grado di trasparenza nelle soluzioni;
La necessità di filtrazione nel caso di utilizzo dei componenti principali del mezzo prodotto internamente, come fase aggiuntiva nel processo di preparazione;
Debole capacità inibitoria contro i microbi gram-positivi associati garantendo allo stesso tempo la crescita degli enterobatteri;
Aumento dei costi ambientali se è necessario utilizzare farmaci importati.
Il brodo Mossel più vicino al proposto è il brodo Mossel commerciale (Merck), che consiste dei seguenti componenti, g/l:
Lo svantaggio di un ambiente commerciale (Merck) è:
Efficienza insufficiente nella crescita e nell'accumulo selettivo di un numero di enterobatteri;
Proprietà inibitorie insufficientemente espresse contro i microbi associati;
Disponibilità limitata.
Lo scopo dell'invenzione è quello di creare un mezzo nutritivo secco domestico per l'accumulo selettivo di enterobatteri, che sia più efficiente, con proprietà selettive più elevate, garantendo l'accessibilità e ottenendo risultati oggettivi di controllo batteriologico.
Il problema è risolto dal fatto che viene proposto un terreno nutritivo secco per l'accumulo selettivo di enterobatteri, contenente una base proteica, glucosio, fosfato di potassio monosostituito e verde brillante, e come base proteica contiene idrolizzato pancreatico di farina di pesce o peptone di carne , o idrolizzato pancreatico di farina di pesce e peptone di carne (in rapporto 1:1), bile modificata purificata (PBM) e cloruro di sodio nel seguente rapporto quantitativo di componenti, g/l:
Opzione uno:
Opzione due:
Opzione tre:
Il risultato tecnico si ottiene attraverso la preparazione preliminare della bile cruda. A questo scopo, la bile bovina nativa viene bollita e filtrata attraverso un tessuto filtrante (belting) in punti isoelettrici, ad ogni valore di pH, per precipitare proteine e peptidi ad alto peso molecolare. La fase finale La preparazione della bile consiste nell'adsorbimento delle impurità mediante carbone attivo, aggiunta della quantità calcolata di fosfato di sodio disostituito in termini di contenuto di sostanza secca, ebollizione e filtrazione. Ciò elimina l'ulteriore aggiunta di fosfato di sodio al terreno, garantendo un'elevata capacità tampone del terreno finito e la sua trasparenza. L'equilibrio della composizione dei componenti del terreno, inclusa la farina di pesce idrolizzata pancreatica (PGHM), come base nutriente proteica, garantisce una buona crescita e le proprietà selettive del brodo Mossel.
Il metodo per produrre il brodo Mossel prevede la miscelazione di ingredienti secchi, g/l:
L'idrolizzato pancreatico di farina di pesce o peptone di carne soddisfa le esigenze di crescita dei microrganismi per la nutrizione azotata. La preparazione preliminare della bile bovina consente di ottenere la bile secca modificata purificata (PBM), che fornisce elevata capacità tampone e trasparenza del mezzo nutritivo finito, proprietà inibitorie contro la flora batterica concomitante indesiderata e accumulo selettivo di enterobatteri, che non viene inibito come un risultato della formazione di prodotti di scarto acidi.
La differenza tra il mezzo proposto e il prototipo è la possibilità di utilizzare, insieme al peptone della carne, l'idrolizzato pancreatico della farina di pesce come base proteica. La tecnologia per preparare la bile grezza utilizzando fosfato di sodio disostituito elimina la sua ulteriore aggiunta al mezzo. Il rapporto quantitativo dei componenti del mezzo nutritivo, il suo pH, assicurano che il mezzo mantenga buone proprietà di crescita, l'efficienza dell'accumulo di enterobatteri e l'effetto inibitorio sulla microflora associata. Il terreno preparato rimane sterile per almeno 10 giorni
Per ottenere un risultato tecnico nella fase di produzione della bile modificata purificata (PBM), bile dopo precipitazione delle proteine nei punti isoelettrici, adsorbimento delle impurità mediante carbone attivo con aggiunta di fosfato di sodio bibasico in ragione di 12,0 g per ogni 20,0 g della bile, in termini di sostanza secca, essiccata in un'unità di essiccazione a letto fluidizzato vibrante A1-FMU.
Esempio 1. Per preparare il terreno secondo la prima opzione, prendere porzioni pesate dei seguenti ingredienti, g/l:
Il terreno proposto, trasparente, verde, garantisce la crescita e l'accumulo dei seguenti ceppi test della famiglia delle Enterobacteriaceae quando inoculati con 0,5 ml di sospensione microbica da una diluizione di 10 -7:
E. coli O55:K59 3912/41
S.flexneri 1a 8516
S.typhimurium 79
K. polmonite 418
K. polmonite 3534/51
Il terreno proposto inibisce significativamente la crescita di microrganismi gram-positivi, in particolare S. aureus Wood-46, da una diluizione di 10 -1.
I ceppi di microrganismi utilizzati per controllare l'ambiente sono stati ottenuti dal dipartimento di raccolta delle colture dell'Istituto federale di scienza del bilancio del Centro scientifico statale di medicina e biologia.
Preparare una sospensione di coltura standard di ciascun ceppo di prova, corrispondente a 10 unità del campione di torbidità standard OSO 42-28-85 P, utilizzando una soluzione sterile di cloruro di sodio allo 0,9%. Le sospensioni di coltura risultanti vengono diluite dieci volte (4,5 ml di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% con 0,5 ml di sospensione microbica) portate ad una diluizione di 10 -7 (per S. aureus Wood-46 - ad una diluizione di 10 -1) e utilizzate per l'ambiente di controllo.
Per determinare le proprietà di crescita, si effettua l'inoculazione con 0,5 ml di una sospensione microbica di ciascun ceppo in esame da una diluizione di 10 -7 in 5,0 ml di brodo Mossel, cioè 10 m.c./ml terreno. Le colture sono state incubate a una temperatura di (37±1)°C per 20-24 ore. I risultati del controllo biologico dei campioni di laboratorio di brodo Mossel su una serie di ceppi test sono presentati nella Tabella 2.
Esempio 2. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 1.
Esempio 3. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 1.
I risultati del controllo biologico sono presentati nella Tabella 2 e sono simili ai risultati dei test nell'esempio 1.
Esempio 4. Per preparare il brodo Mossel secondo la seconda opzione, prendere porzioni pesate dei seguenti ingredienti, g/l:
I campioni vengono agitati in 1 litro di acqua distillata, versati in provette da 5 ml e sterilizzati in autoclave a 121°C per 5 minuti.
Esempio 5. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 4.
I risultati del controllo biologico sono presentati nella Tabella 3 e sono simili ai risultati degli esempi di test 1, 2, 3 secondo l'opzione 1.
Esempio 6. Per preparare il brodo Mossel secondo la terza opzione, prendere porzioni pesate dei seguenti ingredienti, g/l:
I campioni vengono agitati in 1 litro di acqua distillata, versati in provette da 5 ml e sterilizzati in autoclave a 121°C per 5 minuti.
I risultati del controllo biologico del brodo Mossel in conformità con l'opzione 3 sono presentati nella tabella 3 e sono simili ai risultati dei test negli esempi 1, 2, 3.
Esempio 7. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 6.
I risultati del controllo biologico sono presentati nella Tabella 3 e sono simili ai risultati dei test negli esempi 1, 2, 3.
Esempio 8. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 1.
I risultati del controllo biologico sono presentati nella Tabella 2.
Valutazione della qualità del terreno proposto per l'accumulo selettivo di enterobatteri con una violazione del rapporto quantitativo degli ingredienti:
Esempio 9. Il mezzo viene preparato secondo l'esempio 1.
I risultati del controllo biologico sono presentati nella Tabella 2. La violazione del rapporto quantitativo degli ingredienti del terreno negli esempi 8, 9 porta ad un deterioramento delle proprietà di crescita e inibitorie e, di conseguenza, ad una diminuzione del coefficiente di efficienza del accumulo di enterobatteri.
Dalle tabelle delle caratteristiche comparative del controllo biologico (Tabelle 2, 3) è chiaro che il mezzo nutritivo proposto secondo gli esempi 1-7 ha buone proprietà di crescita, è efficace nell'accumulo di enterobatteri e inibisce la crescita di stafilococco.
La registrazione visiva dei risultati dell'accumulo di enterobatteri alla fine del periodo di incubazione delle colture ha mostrato risultati identici nei terreni di prova e di controllo.
Un cambiamento nel rapporto quantitativo dei componenti dell'ambiente porta a una violazione degli indicatori biologici della qualità dell'ambiente proposto.
Pertanto, nel caso della preparazione del terreno secondo gli esempi 8, 9, si osserva una diminuzione dell'efficienza dell'accumulo di enterobatteri e dell'effetto inibitorio del terreno contro S. aureus Wood-46.
Per ottenere dati sull'efficacia del brodo Mossel, le provette inoculate di ciascun ceppo in esame contenenti circa 10 mc/ml - (inoculazione zero) sono state incubate ad una temperatura di (37±1)°C per 3 ore. Per determinare la dose di inoculo 0 1 ml di sospensione microbica di ciascun ceppo in esame da una diluizione 10-7 è stato seminato su piastre Petri con agar GRM. Dopo l'incubazione delle colture nel mezzo di accumulo, il contenuto delle provette è stato miscelato e una semina simile è stata effettuata su agar GRM.
Dopo 18-20 ore di incubazione delle colture su agar GRM alla temperatura di (37±1)°C, sono state contate le colonie formate. L'indicatore di efficienza è stato calcolato dall'aumento del numero di colonie dopo l'incubazione della coltura in un mezzo cumulativo fino al numero di colonie con inoculazione zero.
Le caratteristiche comparative dell'efficacia del brodo Mossel secondo l'opzione 1 sono presentate nella Tabella 3. I risultati dell'efficienza dell'accumulo di enterobatteri nel brodo Mossel preparato secondo l'opzione 2 sono simili e paragonabili ai risultati ottenuti testando il brodo Mossel, opzione 1.
Pertanto, è stato sviluppato un terreno nutritivo secco competitivo domestico per l'arricchimento selettivo degli enterobatteri, che presenta numerosi vantaggi:
l'efficienza dell'accumulo degli enterobatteri è 1,5-2,0 volte superiore rispetto a un ambiente commerciale;
il coefficiente di inibizione contro lo stafilococco è oltre 100 volte superiore a quello di un brodo di arricchimento commerciale;
il mezzo nutritivo è facile da preparare;
è stata sviluppata una tecnologia per la chiarificazione della bile nei punti isoelettrici utilizzando carbone attivo e fosfato di sodio disostituito, che elimina la sua ulteriore aggiunta al mezzo nutritivo e garantisce la trasparenza del prodotto finito;
viene eliminata la necessità di utilizzare fosfato di sodio anidro disostituito nella produzione di preparati secchi;
la possibilità di utilizzare l'idrolizzato pancreatico di farina di pesce insieme al peptone di carne mantenendo la crescita e le proprietà selettive;
| Tabella 1 | |||||
| Brodo cumulativo per enterobatteri secondo Mossel | |||||
| NO. | Nome dei componenti | Brodo EO Mossel Brodo EE, Mossel HiMedia | Brodo enterobatterico arricchito secondo Mossel LLC "GEM" | Brodo Mossel per l'arricchimento di enterobatteri (Enterobacteria Erichment Broth-Mossel OFS 42-0067-07) | |
| 1 | Gelatina idrolizzata pancreatica | - | - | 10,0 | 10,0 |
| 2 | Peptone di carne | 10,0 | 10,0 | - | - |
| 3 | Glucosio monoidrato | 5,5 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
| 4 | Bile di bue | 20,0 | 20,0 | 20,0 | 20,0 |
| 5 | Fosfato di sodio disostituito | 8,0 | 6,45 | 7,0 | 8,0 |
| 6 | Fosfato di potassio monosostituito | 2,0 | 2,0 | 3,0 | 2,0 |
| 7 | Verde diamante | 0,015 | 0,0135 | 0,015 | 0,015 |
| pH del mezzo preparato | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 | 7,2±0,2 |
| Tavolo 2 | ||||||||
| Caratteristiche comparative del controllo biologico del brodo Mossel a base di idrolizzato pancreatico di farina di pesce, g/l | ||||||||
| NO. | Nome del ceppo di prova | Allevamento | opzione 1 | opzione 1 | opzione 1 | opzione 1 | opzione 1 | Brodo di arricchimento di Mossel per enterobatteri (Mossel Broth) Merck |
| Esempio 1 | Esempio 2 | Esempio 3 | Esempio 8 | Esempio 9 | ||||
| 1 | Escherichia coli 25922 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 2 | Escherichia coli 055:K59 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ sedimento |
| 3912/41 | 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | |
| 3 | S.flexneri la 8516 | 10 -7 | ++ | ++ | ++ | + | + | ++ |
| 10 -6 | ++ | ++ | ++ | ++ | + | +++ | ||
| 4 | S.typhimurium 79 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | ++ | +++ | ||
| 5 | K. polmonite | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | ++ | +++ |
| 418 | 10- 6 | +++ | +++ | +++ | +++ | ++ | +++benzina | |
| 6 | S. aureus-Legno-46 | 10 -1 | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | + debole torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | |
| Tabella 3 | |||||||
| Caratteristiche comparative del controllo biologico del brodo Mossel a base di peptone di carne e una miscela di PGRM con peptone di carne in rapporto 1:1, g/l | |||||||
| NO. | Nome del ceppo di prova | Allevamento | opzione 2 | opzione 2 | Opzione 3 | Opzione 3 | Brodo di arricchimento di Mossel per enterobatteri (Mossel Broth) Merck |
| Esempio 4 | Esempio 5 | Esempio 6 | Esempio 7 | ||||
| 1 | Escherichia coli 25922 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | +++ |
| 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 2 | Escherichia coli 055:K59 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | ++ | +++sedimenti |
| 3912/41 | 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | |
| 3 | S.flexneri la 8516 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 4 | S.typhimurium 79 | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ | ||
| 5 | K. polmonite | 10 -7 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++ |
| 418 | 10 -6 | +++ | +++ | +++ | +++ | +++gas | |
| 6 | S. aureus-Legno-46 | 10 -1 | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo | Nessuna torbidità diffusa del mezzo |
| *+++ - crescita eccellente con diffusa torbidità del terreno; ++ - buona crescita con diffusa torbidità del terreno; |
1. Terreno nutriente per l'accumulo selettivo di enterobatteri, secco (Mossel Broth), contenente una base proteica, glucosio, fosfato di potassio monosostituito e verde brillante, caratterizzato dal fatto di contenere idrolizzato pancreatico di farina di pesce come base proteica, contenente inoltre idrolizzato pancreatico di farina di pesce come base proteica, contenente inoltre modificato purificato bile (PBM) e cloruro di sodio nel seguente rapporto quantitativo dei componenti, g/l:
2. Terreno nutritivo per l'accumulo selettivo di enterobatteri, secco (brodo Mossel), contenente peptone di carne, glucosio, fosfato di potassio monosostituito e verde brillante, caratterizzato dal fatto di contenere bile modificata purificata (PBM) e cloruro di sodio nel seguente rapporto quantitativo di componenti, g/l:
3. Terreno nutritivo per l'accumulo selettivo di enterobatteri, secco (Mossel Broth), contenente una base proteica, glucosio, fosfato di potassio monosostituito e verde brillante, caratterizzato dal fatto che la base proteica contiene idrolizzato pancreatico di farina di pesce e peptone di carne in una miscela 1: 1, contiene inoltre bile modificata purificata (PBM) e cloruro di sodio nel seguente rapporto quantitativo di componenti, g/l:
Brevetti simili:
L'invenzione riguarda un set di primer e sonde oligonucleotidiche per l'identificazione e la sottotipizzazione del DNA del batterio Pasteurella multocida sierotipi A, B, D, E, F mediante real-time PCR.
L'invenzione riguarda un set di sonde oligonucleotidiche marcate in modo fluorescente per la tipizzazione di ceppi di Burkholderia mallei. Le sonde incluse nel kit hanno una struttura a forcina con alle estremità un fluoroforo ed un quencher di fluorescenza e sono complementari ai prodotti della reazione di amplificazione con i primer.
L'invenzione riguarda la microbiologia alimentare, in particolare la produzione di un mezzo nutritivo per la determinazione di microrganismi che producono lipasi nei prodotti dolciari.
L'invenzione riguarda la medicina e può essere utilizzata per identificare microrganismi produttori di ureasi, in particolare Helicobacter pylori. Per fare ciò, viene effettuata un'analisi rapida sui dischi diagnostici per determinare l'attività dell'ureasi dei campioni.
Il gruppo di invenzioni riguarda la biochimica. Un metodo per ottenere un campione standard della torbidità delle sospensioni batteriche, un campione standard della torbidità delle sospensioni batteriche, l'uso di un campione standard della torbidità delle sospensioni batteriche, nonché un kit contenente un campione standard della torbidità delle sospensioni batteriche vengono proposte sospensioni batteriche.
Vengono presentati set di sonde oligonucleotidiche e primer, un microchip biologico e un sistema di test per identificare e tipizzare i virus dell'influenza A e B. Il sistema di test caratterizzato contiene: un set di reagenti per isolare l'RNA del virus dell'influenza da materiale biologico umano; un set di reagenti per eseguire l'amplificazione mediante PCR combinata con la trascrizione inversa per formare frammenti marcati in modo fluorescente del genoma del virus dell'influenza, contenenti i primer oligonucleotidici descritti; un set di reagenti per l'ibridazione di frammenti di DNA ottenuti dopo amplificazione su un biochip contenente elementi con sonde oligonucleotidiche descritte immobilizzate; e, se necessario, controlli negativi e positivi.
L'invenzione riguarda la biotecnologia, in particolare la determinazione del contenuto di microrganismi in vari oggetti e ambienti. Il metodo prevede la coniugazione di batteri con un marcatore elettrochimico, che è Fe0, MgFe2O4 o Fe3O4, effettuata in un ambiente acquoso secondo parametri specificati.
L'invenzione riguarda il campo della microbiologia medica e della biotecnologia, in particolare quello microbiologico diagnostica di laboratorio malattie infettive. Il terreno nutritivo contiene triptone, estratto di lievito, glucosio, cloruro di sodio, eritrociti umani 0(I) gruppo Rh(+), solfato di ferro(II), agar Difco e acqua distillata in rapporti di componenti specificati.
L'invenzione riguarda la biotecnologia e può essere utilizzata in studi batteriologici sull'isolamento e l'identificazione di batteri del genere Klebsiella e sulla produzione di terreni nutritivi per questi studi.
È stato dichiarato un gruppo di invenzioni relative all'industria alimentare e della fermentazione: colture di kombucha Fungi Tea, Medusomyces gisevii alfa e Medusomyces gisevii, nonché un metodo per produrre una base fermentata per la produzione di kvas, un metodo per produrre la coltura di kombucha liquido e un metodo per produrre bevande da succhi di verdura o verdure fermentate.
L'invenzione riguarda il settore della biotecnologia, della microbiologia e dell'agricoltura e può essere utilizzata per ottenere un preparato batterico contro le malattie delle piante causate da funghi fitopatogeni del genere Fusarium, Microdochium, Pyrenophora e Puccinia. Composizione immunogenica per il trattamento o la prevenzione del Clostridium difficile, un metodo per la sua preparazione e un metodo per indurre una risposta immunitaria a c. difficile // 2550271
Viene proposta una composizione immunogenica da utilizzare nel trattamento o nella prevenzione di malattie associate a Clostridium difficile, un metodo per produrre tale composizione miscelando i suoi ingredienti costitutivi e un metodo per indurre una risposta immunitaria a C.
L'invenzione riguarda il campo della biotecnologia. Il ceppo della specie Microbacterium è depositato con il numero di registrazione BKM Ac-2615D, utilizzato per la purificazione di corpi idrici salmastri e marini. L'invenzione fornisce una maggiore distruzione di frazioni nafteniche, composti eterociclici e resine, nonché composti poliaromatici, benzo(a)pirene e benzo(a)antracene nell'olio. 1 illustrazione, 2 tavole, 1 ex.
Il gruppo di invenzioni riguarda la biotecnologia. Le opzioni per il terreno nutritivo per l'accumulo selettivo di enterobatteri contengono idrolizzato pancreatico di farina di pesce o peptone di carne o idrolizzato pancreatico di farina di pesce e peptone di carne, bile modificata purificata, cloruro di sodio, glucosio, fosfato di potassio monosostituito e verde brillante in un dato rapporto. Le invenzioni consentono di aumentare l'efficienza dell'accumulo di enterobatteri, le proprietà selettive del mezzo e semplificare il metodo per ottenere un mezzo nutritivo. 3 n.p. file, 3 tabelle, 9 pr.
Base per brodo di arricchimento Bolton
Scopo
Terreno di coltura liquido utilizzato per l'isolamento Campylobacter da campioni alimentari, secondo la norma ISO 10272-1:2006.
Descrizione
Bolton Broth Base è un brodo arricchente per Campylobacter da campioni di cibo. Durante la lavorazione e la conservazione di prodotti alimentari, cellule Campylobacter danneggiati, la loro riproduzione e crescita possono essere stimolate mediante doppia incubazione in brodo Bolton.
L'acqua peptonica della carne e l'idrolizzato di lattoalbumina sono fonti di carbonio e azoto necessari per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce l'equilibrio osmotico e il carbonato di sodio neutralizza l'acido formato durante la crescita dei microrganismi. L'estratto di lievito e l'acido chetoglutarico agiscono come fattori di crescita. L'inclusione di metabisolfito di sodio, piruvato di sodio ed emina neutralizza le sostanze tossiche che possono formarsi nel terreno di coltura sotto l'influenza dell'ossigeno e consente di fare a meno dell'atmosfera microaerobica. Il sangue lisato è necessario per neutralizzare gli antagonisti del trimetoprim presenti nell'ambiente.
La selettività della fase di arricchimento è ottimizzata da un additivo selettivo (Articolo 06-131-LYO): la vancomicina è attiva contro i microrganismi gram-positivi. Il cefoperazone agisce principalmente sui batteri gram-negativi. Il trimetoprim è efficace contro un'ampia gamma di cellule gram-positive e gram-negative e la cicloesimide o l'amfotericina B sono fungicidi efficaci.
Preparazione
Sciogliere 13,8 g di polvere in 500 ml di acqua distillata, scaldare se necessario. Sterilizzare in autoclave per 15 minuti a 121ºC. Raffreddare a 47-50°C, aggiungere in asettico 25 ml di sangue di cavallo lisato e 1 flacone di Selective Supplement Campylobacter Bolton (Articolo 06-131-LYO). Mescolare bene. Versare il terreno preparato in contenitori appropriati.
Nota: Se il brodo di arricchimento viene preparato in anticipo, può essere conservato a temperatura ambiente fino a 4 ore o al buio a 3 ± 2°C fino a 7 giorni.
Tecnica di semina
Il campione viene aggiunto al terreno in una quantità (in peso o volume) pari a nove volte il volume di Bolton Selective Enrichment Broth per ottenere un rapporto campione/terreno di 1:10 (p/v o v/v) e omogeneizzato .
Bolton Selective Enrichment Broth non richiede incubazione microaerobica, ma deve essere utilizzato in contenitori ben avvitati riempiti con meno di 20 mm di spazio di testa nella parte superiore.
Incubare la sospensione iniziale ad una temperatura di 37°C per 4-6 ore, quindi a 41,5°C per 44 ± 4 ore.
Per i metodi di isolamento e identificazione, vedere ISO o Manuale di analisi batteriologica (BAM).
Magazzinaggio
Il terreno è solo per uso di laboratorio. Conservare il terreno in un barattolo con coperchio ben chiuso, in un luogo buio, asciutto e fresco (temperatura compresa tra +4°C e 30°C e umidità<60%)
Controllo di qualità
