Особое внимание в настоящее время уделяется диагностированию ВИЧ (вируса иммунодефицита) у человека. Обнаружение болезни на ранней стадии поможет раньше начать лечебный курс и это существенно скажется на увеличении срока жизни больного.
После того, как будет сдан анализ на ВИЧ расшифровка результатов, как правило, бывает положительной, или отрицательной. При этом существует первичная диагностика и вторичная. При первичной - человека проверяют с помощью ИФА. Если это необходимо, делается повторный анализ крови на ВИЧ. Что значит положительный и отрицательный результат? Как делается расшифровка анализа на ВИЧ? Почему у человека, который не является наркоманом и алкоголиком, имеет постоянного полового партнера, расшифровка анализа на вирус иммунодефицита дает положительный, но сомнительный результат?
О ВИЧ
Возбудители заболевания бывают 1-ого и 2-ого типа. Продолжительный промежуток времени их присутствие у человека проходит незамеченным, дальше поражается в первую очередь иммунитет, затем другие системы человека.
При основном методе лабораторного диагностирования вируса иммунодефицита выявляются антитела к ВИЧ. Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе метода, он чувствителен (99,5% и выше) и специфичен (99,8% и выше). Кроме этого, при диагностировании ВИЧ с помощью ИФА определяют антиген р24.
Каждая тест-система имеет различные показатели, в связи с этим ими происходит определение различных белковых структур вирусных оболочек. Возбудители ВИЧ бывают двух подтипов: 1-ого и 2-ого или ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Вирусные частицы выглядят как сферическая форма, имеющая наружную фосфолипидную оболочку. Для 1-ого подтипа она имеет следующую молекулярную массу: gp120, gp41, gp160. 2-ой подтип содержит gp105, gp36, gp140. Для внутренней оболочки вируса молекулярная масса так же известна. Для 1-ого подтипа это - p55, p17, p24. Для 2-ого - p16, p25, p55.
Для каждой тест-системы, чтобы определить вирус, существует три основных набора белков.
Вообще результат ИФА может быть:
- отрицательный;
- ложноположительный;
- ложноотрицательный;
- сомнительный или неопределенный.
Методами диагностирования выявляются антигены, антитела.
О нормальном результате
Норма - что это значит? Когда анализ на ВИЧ отрицательный, это считается нормой.
1. Последнее поколение тест-систем ИФА позволяют определить наличие антител к ВИЧ и белковых частиц. Если анализ в норме, то в крови не находят антител и белковых частиц возбудителя. Но точно сказать, что человек здоров на основе этого можно, если до сдачи его отсутствовал риск заражения 3 месяца. В противном случае еще раз через какое-то время надо повторить сдачу анализов.
Бывали случаи, что ВИЧ обнаруживали только через 6 месяцев. Поэтому, если результат отрицателен, а был контакт с ВИЧ-инфицированным больным, для достоверности надо повторить сдачу анализов через три, четыре и шесть месяцев. Бывает, что ИФА дал отрицательный результат, а у человека явно есть подозрение на присутствие признаков ВИЧ, то рекомендуется сдать анализ еще раз. Ошибочный результат возможен из-за ранних сроков проведения анализа либо из-за человеческого фактора.
2. Если результат отрицательный получен при иммуноблоте, то в настоящее время это самый достоверный анализ.
Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, а результат отрицательный, то скорее всего это врачебная ошибка, которая может возникнуть на любом этапе проверки. Если при повторе иммуноблота через три и шесть месяцев результат отрицательный, то беспокоиться не о чем, это говорит о норме. И только после отрицательного ответа иммуноблота будет выдана справка, что ВИЧ анализ отрицательный.
3. ПЦР исследование у взрослых при диагностировании вируса иммунодефицита используется крайне редко, а для только что рожденных детей используется именно этот метод.
Нормой здесь так же считается отрицательный результат.
4. Согласно социологическим исследованиям, многие пользуются экспресс-тестом на ВИЧ. При виде отрицательной полоски люди успокаиваются и отказываются идти в медицинское учреждение, даже при наличии всех признаков ВИЧ-инфицирования. Но надо знать, что точность экспресс-теста составляет восемьдесят пять процентов. Кроме этого, в домашних условиях можно неверно его провести, или будут нарушены условия его хранения. Возникает еще большая вероятность, что результат неверен. Даже прием за 8 часов до тестирования минеральной щелочной воды повлияет на результат теста. Поэтому о том, что вирус иммунодефицита отсутствует у человека на основании экспресс-теста, даже если он отрицательный, далеко не всегда является верным утверждением.
Расшифровка анализа
После того, как было проведено тестирование у людей часто возникает вопрос, как расшифровать результат исследований, что делать, если получен положительный результат на ВИЧ.
1. Если ИФА показал наличие всех или почти всех антител к антигенам согласно данной тест-системы, это обозначает положительный анализ на ВИЧ. Если ответ после проведения второго серологического иммуноферментного анализа положительный, то необходимо провести иммуноблот. Расшифровка результатов его будет более верной. Если иммуноферментный анализ дал положительный результат, следующий анализ иммуноблота так же показал наличие ВИЧ, то ставится заключительный результат. Когда расшифровываются анализы, то надо знать, что положительный тест на ВИЧ определяется:
- от 60% до 65% через 28 дней после заражения;
- в 80% - через 42 дня;
- в 90% - через 56 дней;
- в 95% - через 84 дня.
Если получен ответ на ВИЧ положительный, то это будет означать, что выявлены антитела к вирусу. Чтобы избежать ложноположительный ответ, надо сдать повторно анализы, желательно два раза. Если антитела к иммунодефициту выявлены при сдаче двух анализов из двух либо при сдаче 3-х анализов в 2-х из них, то считается, что результат положительный.
Антиген р 24 можно выявить в крови уже через 14 дней со дня заражения. С помощью метода иммуноферментного анализа этот антиген выявляется от 14 до 56 дней. По прошествии 60 дней его в крови уже нет. Только когда в организме формируется СПИД, происходит повторно рост этого белка р24 в крови. Поэтому тест-системы иммуноферментного анализа используются, чтобы обнаружить ВИЧ в первые дни заражения либо для того, чтобы определить, как протекает заболевание и контролировать процесс лечения. Высокая аналитическая чувствительность иммуноферментного анализа обнаруживает антиген р24 в биологическом материале при ВИЧ первого подтипа в концентрации от 5 до 10 пкг/мл, при ВИЧ второго подтипа от 0,5 нг/мл и меньше.
2. Под сомнительным результатом иммуноферментного анализа подразумевается, что при диагностировании где-то ошиблись, как правило, что-то перепутали медицинские работники, или у человека есть признаки инфицирования, а результат отрицательный, что вызывает подозрение, человека направляют на повторную сдачу анализа.
3. Под ложноположительным результатом понимается результат, когда сдача анализов крови была сделана при следующих состояниях больного:
- беременность;
- если у человека нарушен гормональный фон;
- при продолжительной иммунодепрессии.
Как расшифровать анализ в этом случае? Ложноположительный результат ставится, если выявляется хотя бы один белок.
Из-за того, что антиген р24 очень зависит от индивидуальных вариаций, то, используя этот метод, в первый период заражения выявляется от 20% до 30% больных.
О показателях после исследования методом полимеразной цепной реакции
Используя этот метод РНК ВИЧ и ДНК обнаруживается почти сразу после заражения. Но окончательного диагноза не ставится, требуется обязательное подтверждение другими методами. «Помогите расшифровать результат ПЦР.» - довольно часто можно услышать такую просьбу. Что пишется в этом случае, если обнаруживается вирус иммунодефицита? При ответе на результат анализа, сделанного с помощью ПЦР указывается количество копий РНК в миллилитре крови. В таблице, приведенной ниже, показан результат в зависимости от количественных характеристик в крови.
Использовать вышеприведенную таблицу хорошо, когда делается обследование на СПИД, так как по ней легко определяется стадия болезни.
Эти таблицы с учетом различных тест-систем есть в лабораторных кабинетах для каждого метода иммуноферментного анализа и иммуноблоттинга.
Часто просят: «Расшифруйте ответ после исследования методом полимеразной цепной реакции по показателю СД4.» Нормальным считается количество клеток СД4 от 600 до 1900 клеток на миллилитр биологического материала. Это соответствует ВИЧ-отрицательному статусу. Но надо знать, что эти показатели даже у здоровых людей бывают не в этом диапазоне.
В современном мире уже много лабораторий имеют хорошее оборудование, с помощью которого можно полностью исследовать организм на содержание в нем ВИЧ-инфекции.
Вконтакте
Проблема СПИДа и ВИЧ на сегодняшний день стала очень актуальна, причем во всем мире. О том, сколько людей (почти полмиллиона) умирает ежегодно от синдрома приобретенного иммунодефицита, известно не понаслышке врачам. СПИД и ВИЧ — два разных диагноза. СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) — это уже прогрессирующая болезнь, которая становится фатальной для многих заразившихся, ВИЧ — это лишь вирус, позволяющий людям жить с ним очень долгое время и быть переносчиками болезни.
Говоря простыми словами, при синдроме приобретенного иммунодефицита полностью отсутствует иммунитет — антитела, которые борются с инфекцией, вирусами и бактериями, попадающими в кровь. Человек, у которого диагностирован СПИД, может умереть от самого безобидного насморка. ВИЧ и СПИД не передаются грызунами, через укусы насекомых или предметы личной гигиены. Главная связующая для заражения — это кровь и сперма. Единственная возможность убедиться в том, присутствуют ли антигены — это сдать анонимно кровь на СПИД и ВИЧ. Причем сдать анализ можно по желанию — анонимно либо не скрывая своих данных.
После того как будет проведена расшифровка и будут известны результаты, можно будет узнать, положительный результат или нет. Даже если человек не ведет беспорядочную половую жизнь и не является антисоциальным (не употребляет наркотики и алкоголь), показатель и результат может быть положительным, но сомнительным.
Перед тем как сдать анализ на ВИЧ анонимно, необходимо сдать клинический анализ крови и затем сделать вывод — сомнительный он или нет. То есть определить вирус иммунодефицита — отрицательный или ВИЧ-положительный, можно только после сдачи крови анонимно. После того как будет сделана расшифровка и обработаны результаты, можно будет делать какие-либо выводы.
Показатели антител при ложноположительном результате на ВИЧ (анонимно) будут превышать норму. Но по одним показателям сказать о том, что у человека присутствует вирус — невозможно. В 50% случаев показатели могут быть завышены совсем по другим причинам.
Многих людей интересует вопрос — сколько времени нужно на получение результатов и каков срок годности анализа. Неважно анонимный анализ или открытый, срок действия его — 5-6 месяцев. А на вопрос, сколько ждать результат, можно ответить однозначно — 2-3 недели.
Диагностика ВИЧ проводится несколькими этапами:
- проведение иммуноферментного анализа (ИФА);
- методика иммуноблоттинга.
Иммуноферментный клинический анализ крови на ВИЧ проводится для того, чтобы выявить суммарный спектр антител против антигенов вируса иммунодефицита. Этот метод скрининговый. Он определяет подозрительные антитела и отсеивает здоровые. Но провести это исследование крови недостаточно. Именно на этом этапе возникают ложноположительные результаты.
Иммуноблотинг — более развернутый анализ крови на ВИЧ. С его помощью подтверждается факт инфицирования. Суть его — разрушение вируса на антигены (ионизированные аминокислотные остатки, которые имеют разный заряд). Применяя электрофорез (выделение из крови плазмы и красных кровяных телец) и исследуя в дальнейшем сыворотку, доктора выявляют, присутствуют ли антитела, которые взаимодействуют с вирусом иммунодефицита. Этот метод намного эффективнее, но и не может дать гарантии.
Ложноположительные результаты на вирус иммунодефицита встречаются довольно часто, буквально подвергая в шок человека сдающего кровь. Дело все в том, что существует масса заболеваний, которые могут спровоцировать ложноположительный результат.
Следует отметить, что ИФА на СПИД, можно назвать лишь предварительным тестированием на вирус иммунодефицита и полагаться на его описание совсем не нужно. В большинстве случаев, сдать его предлагают для общей клинической картины. Лишь после второго этапа сдачи анализов анонимно можно удостовериться, сомнительный результат крови на СПИД, ВИЧ или нет.
Многие люди задают вопрос, сколько времени длится само исследование. Для забора крови необходимо 15-20 минут. Для исследования применяются только одноразовые медицинские средства. К слову, гораздо проще заразиться вирусом иммунодефицита в парикмахерской или в кинотеатре, чем в медицинской лаборатории.
Даже самое ультрасовременное оборудование не всегда способно определить наличие антител и антигенов ВИЧ-инфекции. И дело не в самом оборудовании, а в периоде размножения клеток вируса в крови. В некоторых случаях, особенно после сдачи ИФА на СПИД и вируса иммунодефицита, люди получают ложноположительный результат. Но это не значит, что у человека действительно есть СПИД. Для этого необходимо сдать повторные анализы через некоторое время (срок годности результата действителен около полугода). Причины, по которым результат может стать ложноположительным, причем неважно анонимный он или нет — нарушения правил сдачи крови. Обычные семечки или предварительно употребленные в пищу острые, кислые, жареные продукты, и даже минеральная газированная вода, особенно щелочная — например, боржоми, могут спровоцировать сомнительный результат, неважно, сколько их съедено — много или мало.
Только высококвалифицированные медицинские лаборатории могут гарантировать проведение анонимных и точных исследований. Но для того чтобы удостовериться раз и навсегда, что нет вируса СПИДа или ВИЧ, исследование лучше повторить через полгода. Это нужно больше не врачам, а самим людям. Период окна присутствует у всех людей. Еще он называется инкубационным периодом, и сразу после заражения выявить вирус иммунодефицита никак нельзя. Не нужно останавливаться, если результат положительный, возможно, он ложноположительный.
Как квалифицируется инкубационный период ВИЧ
Начальная стадия заражения вирусом иммунодефицита человека практически в 99% никак не проявляет себя. Это зависит от общего состояния иммунитета и организма в целом. Может пройти немало времени, пока у человека появятся уже симптомы, подтверждающие наличие антигенов ВИЧ. Но с другой стороны, человек остается источником заражения для других людей. Присутствует ли ВИЧ можно определить, только если сдать ИФА через 3-6 месяцев после фактического заражения. Период окна — это временной отрезок. Начало его — это проникновение вируса в кровь, окончание — выявление вируса. У каждого человека период окна разный. Сколько длится период окна? Примерно от 2 до 5-6 месяцев. И от этого периода зависит, насколько исследование будет точным. Именно в этот отрезок времени, результаты, под действием некоторых факторов, могут быть ложноположительными.
Ложноположительный анализ на ВИЧ (анонимный)
Идеальное обследование на ВИЧ — это 100% точность определения, есть ли вирус или нет. Но по ряду причин, результат может быть сомнительный. На сегодняшний день очень модный и распространенный считается анализ анонимно в домашних условиях. Это обеспечивает людям полную конфиденциальность, но не может уберечь от ошибок. Именно в домашних условиях результаты тестов часто становятся ложноположительными.
Для того чтобы развеять сомнения, лучше сдать анализ ИФА в квалифицированных лабораториях. В этом случае риск того, что результат будет сомнительный исключен на 99,9%. Помимо этого, домашние исследования могут дать совсем не ожидаемый людьми результат, как положительный, так и отрицательный.
Состояния, которые могут спровоцировать ложноположительный результат:
- перекрестные реакции;
- период беременности (группа риска — несколько раз рожавшие женщины);
- наличие нормальных рибонуклеопротеинов;
- многократная сдача донорами крови;
- инфекционные поражения дыхательной системы;
- вирус гриппа и гепатита;
- недавно сделанные прививки (столбняк, гепатит В, грипп);
- очень густая кровь;
- первичные аутоиммунные заболевания печени;
- вирус туберкулеза;
- вирус герпеса;
- плохая свертываемость;
- лихорадка;
- заболевания печени, вызванные алкоголем;
- артрит;
- нарушение иммунорегуляторных процессов;
- поражение мелких сосудов организма;
- онкологические заболевания;
- разные виды склероза;
- пересадка органов;
- повышенный билирубин;
- повышенный уровень антител;
- критические дни.
Некоторые заболевания могут стать причиной перекрестных реакций. Например, из-за аллергии в крови могут вырабатываться непонятные для организма антигены, которые он распознает как чужеродные. Такие антигены могут стать причиной ложноположительного результата.
В период беременности у женщины происходит гормональный сбой, поэтому в некоторых случаях может быть ложноположительный результат на сдаче анализа. При менструальном цикле кровь на вирус иммунодефицита не рекомендуется сдавать.
Любые инфекционные, грибковые и вирусные заболевания практически всегда дают положительный результат на наличие вируса иммунодефицита. По этой причине врачи советуют пройти лечение болезни, и лишь спустя 25-30 дней пройти обследование.
Заболевания, онкология, повышенный показатель билирубина, прививки — все эти факторы влияют на результат. Если в крови присутствует нестандартный набор ферментов, то анонимный анализ будет ложноположительным.
По этим причинам, доктора не сообщают людям, что у них уже диагностирована вирусная инфекция иммунодефицита. И услышав о том, что анализ положительный, человек в первую очередь должен задуматься о том, что могло спровоцировать положительный результат.
Очень часты ложноположительные результаты анализов на вирус иммунодефицита человека после трансплантации органов, особенно в период, когда орган приживается. В этом случае вырабатываются неизвестные антитела, которые при сдаче анализа кодируются как антигены вируса иммунодефицита.
Перед сдачей анонимного анализа на ВИЧ или СПИД, нужно обязательно оповестить врача о том, присутствует ли заболевание и сколько оно длится. Сделать это нужно для того, чтобы исключить ложноположительный анализ.
Чтобы не стать заложником ложноположительного анализа
Анализ ИФА необходимо провести после сомнительного контакта через 6-12 недель. В этот период обнаруживаются антитела вируса иммунодефицита человека. В этом случае на 70% ложноположительный анализ можно исключить.
Перед сдачей крови на ВИЧ (ИФА) нужно не нарушать диету, не употреблять алкоголь, наркотики и не жить половой жизнью хотя бы за 2-3 недели до сдачи анализа на ВИЧ. Кровь сдается только натощак. Сколько врач возьмет крови, и сколько стоит анализ, а также срок годности анализа можно узнать непосредственно в медицинском центре. При имеющихся вирусных или инфекционных заболеваниях лучше анализ не сдавать, необходимо обратиться в лабораторию через 35-40 дней после выздоровления. При наличии других хронических заболеваний, следует сообщить врачу.
Даже если анализ оказался положительным, не нужно впадать в панику, возможно, он ложноположительный. Сколько месяцев должно пройти после первой сдачи?
Через 3-4 месяца анализ ИФА уже можно пересдать. У человека, в крови которого нет вируса иммунодефицита, результат будет гарантированно отрицательным.
Многих людей интересует вопрос о том, сколько живет ВИЧ? Вирус иммунодефицита человека, попадая на воздух, гибнет практически мгновенно. Погибает он при температуре выше 40°C. Поэтому если бы можно было подогреть кровь человека до такой температуры, ВИЧ был бы побежден, и не умирало бы столько людей, сколько на сегодняшний день погибает от вируса.
Ложноположительный анализ на ВИЧ — ошибки медиков
Очень часто люди становятся заложниками ложноположительного анализа на ВИЧ, СПИД не только из-за того, что сдан только ИФА анализ, но и из-за ошибок медицинского персонала. Ложноположительный результат может быть спровоцирован:
- неправильной транспортировкой забранной крови;
- применением некачественной сыворотки для анализа ИФА;
- неправильным хранением забранной крови;
- при нарушениях правил забора крови.
Совершая халатные действия, некомпетентный медперсонал ставит под вопрос социальное развитие личности человека. Конечно, не во всех медицинских центрах допустимы подобные ошибки. В основном, даже беременные женщины, идут в обычную больницу, чтобы сдать кровь на ВИЧ и СПИД без всякой боязни.
На сегодняшний день многие лаборатории оснащены хорошим оборудованием, которое поможет провести полное и расширенное обследование на наличие в крови вируса иммунодефицита человека.
January 15th, 2014
Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?
Нет, если ВИЧ есть в организме, и если антитела смогли связать так много антигена, что АГ-линия теста его перестает видеть, то она однозначно уже выявит антитела к ВИЧ, и тест все равно будет положительный.
Какого поколения был мой тест?
Для Российской Федерации - четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».
Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?
Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов - невозможно
. Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:
- 14 дней ();
- 17-18 дней (2,5 недели) ();
- 3-4 недели ();
- Один месяц ().
Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ?!!!
Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше - месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.
.
У 950 из 1000 человек ИФА тест 3 поколения или только АТ-линия теста 4 поколения выявит антитела к ВИЧ через 4 недели. Оставшиеся 49 человек выявят антитела на 5, 6, 7, 8 неделе, и совершенно точно через 12 недель. Остается вот этот 0,1%, который медицина оставит на всякий редкий и казуистический случай. Но, важно заметить, что мы только что говорили лишь о антителах, а тесты 4 поколения выявляют еще и антиген ВИЧ, известно, что АГ в промежутке с 1 по 8 неделю будет выявлен у 95% инфицированных, и в сумме АГ и АТ линия тест-системы даст лучшие параметры , чем 95% через 4 недели или 99,9% к 12 неделе. Надежнее быть не может, этого совершенно достаточно.
Если Вы считаете, что у Вас был рискованный контакт, то сделайте ИФА после 6 неделе после опасного контакта - достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9%. Многие эксперты считают срок в 6 недель для ИФА 4 поколения в условиях лаборатории совершенно достаточным для исключения ВИЧ-инфекции, но даже самые консервативные руководства не рассматривают целесообразность повторного тестирования после 12 недель. Выводы делайте сами.
На любых сроках от потенциально опасной ситуации после 6-12 недель ИФА не увеличивает и не теряет своей надежности, оставаясь точным методом диагностики и через год, и через два и далее. В очень редких случаях диагностические проблемы могут возникать у очень тяжелых, фактически терминальных пациентов, с развернутой картиной СПИДа. Подробнее можно почитать об этом, также там даны ответы на вопросы о т.н. поздней сероконверсии.
Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга.
основан на выявлении антител в крови и биологических жидкостях исследуемого. Используются в случаях, когда необходимо быстро получить результат.
Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4: CD8.
Анализ на ВИЧ анонимно
В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.
Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.
Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.
Анализ на ВИЧ принудительно
Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:
- Доноры крови и другого биологического материала.
- При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
- Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
- При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.
Принудительное тестирование населения на ВИЧ является бесперспективным и противоречит соблюдению прав человека. Принудительное тестирование населения в РФ является незаконным.
Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.
Сколько стоит анализ на ВИЧ
В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках - платное:
- Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
- Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 - 7 дней.
- Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 - 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 - 14 дней.
Сколько делается анализ на ВИЧ
В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:
- При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
- При применении ИФА 4-го поколения - 6 недель.
- При применении ПЦР - 4 недели.
Как сдавать анализ на ВИЧ
- Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 - 4 недели от предполагаемого заражения.
- Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.
Из жидкости можно употреблять только обычную воду.
- Для анализа осуществляется забор 3 - 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
- До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
- Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре +4 - +8 о С.
Рис. 6. Для анализа осуществляется забор 3 - 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
При заборе крови из вены вирусом иммунодефицита человека заразиться невозможно.
Ложноположительный анализ на ВИЧ и другие виды результатов исследования
Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.
Сомнительный результат теста получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 - 3 месяца в течение полугода.
Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.
Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.
Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание , аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.
Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы. В большинстве случаев ложноотрицательный результат получается при технической ошибке или браке в тест-системе, что встречается крайне редко ввиду проведения жесткого контроля качества на всех уровнях.
Анализ на ВИЧ необходимо отложить минимум на две недели после перенесенного инфекционного заболевания или вакцинации.
Тест-системы, определяющие наличие антител к ВИЧ
При помощи тестирования на антитела в вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.
Антитела к ВИЧ
Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител - специфических иммуноглобулинов . С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител). Раньше всех (через неделю после инфицирования) появляются иммуноглобулины класса IgМ. Их рост отмечается в течение месяца и далее они сохраняются еще около 30 дней. Иммуноглобулины класса IgG циркулируют в крови несколько лет. Их выявление является показателем наличия ВИЧ-инфекции.
Антитела к ВИЧ появляются через 2 - 4 нед. после инфицирования и далее они определяются в крови на протяжении всего заболевания.
Период «окна» при ВИЧ
Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 - 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц. Выявить инфицированного можно через более короткий (1 - 2 недели) период после заражения, для чего применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако из-за дороговизны данный вид исследования для скрининга не используется.
Иммуноферментный анализ при диагностике ВИЧ
У 90 - 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 - 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 - 1% - в более поздние сроки . В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.
ИФА при диагностике ВИЧ проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ - р24 и gр160. С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты , является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом - иммунного блота. При этом используется тот же образец крови. При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Тест видит как антитела (вырабатываются организмом больного), так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты . Однако более надежным, как считают специалисты здравоохранения, являются сроки 6, 8 или 12 (в РФ) недель.
Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.
Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.
Для первичного обследования групп лиц с целью выявления ВИЧ-инфекции применяется только методика ИФА.
Метод иммуноблотинга
Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов - эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко. Достоверность полученных результатов достигает 99%. Иммуноблотинг является дорогостоящей методикой и требует высокой специализации специалиста, проводящего исследование. Возможно получение сомнительных результатов.
Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env » (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu », «vpr », «vif », «tat », «nef », «rev », «tat ».
Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 - антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.
При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.
Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.
Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.
Тест-системы для подсчета СД4-лимфоцитов
Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.
СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии. По количеству СD4-лимфоцитов определяется время начала специфического лечения (антиретровирусной терапии) и профилактики оппортунистических инфекций, оценивается эффективность лечения.
- При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
- При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается сидром приобретенного иммунодефицита - СПИД.
- При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.
Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.
CD 8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer - убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 - 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.
Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 - 0,8 развивается СПИД.
При получении положительных результатов тестирования человек должен стать на учет в государственное учреждение Центр профилактики и борьбы со СПИД, где будет установлен мониторинг за его состоянием и назначено адекватное специфическое лечение.
Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.
Тест на ВИЧ с применением ПЦР
Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции - полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя - РНК уже через 1 - 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы. Данная методика является дорогостоящей и поэтому в настоящее время для скрининга не используется. К тому же значимой проблемой исследования является возможность получения ложноположительных результатов.
Суть методики ПЦР при ВИЧ
Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.
Возможности ПЦР при ВИЧ-инфекции
Общий анализ крови на ВИЧ
В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.
Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.
Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.
Диагностике вируса иммунодефицита в современном мире уделяется много внимания. Ведь чем раньше человек узнает о страшном диагнозе, тем быстрее он сможет обратиться к специалистам за профессиональной помощью. Соответственно, лечение данного заболевания можно будет начать раньше. Своевременное использование специальной антиретровирусной терапии позволяет существенно увеличить срок жизни инфицированного вирусом иммунодефицита. Важно отметить, что в современной диагностике есть разделение на первичную и вторичную. Первичная предполагает проверку пациента при помощи иммуноферментного анализа. Результат ИФА на ВИЧ в случае необходимости перепроверяется. Как и почему это происходит, и каким может быть результат первичного исследования?
ИФА ВИЧ отрицательный, положительный или сомнительный: условия постановки диагноза и дальнейшие действия пациента
Положительный ИФА на ВИЧ не всегда говорит о том, что человек инфицирован. Но прежде чем дать ответ на вопрос о том, почему так происходит, следует узнать, каким может быть результат иммуноферментного анализа. Достоверность ИФА ВИЧ составляет примерно девяносто восемь – девяносто девять процентов. Погрешность данное исследование имеет небольшую. При анализе у пациента берут кровь из вены. Проводится исследование натощак. Далее биологический материал проверяют в лаборатории при помощи специальных реактивов и ферментов, для того чтобы определить, вступают ли ее составляющие в реакцию с искусственными антителами вируса иммунодефицита. Несмотря на то, что точность ИФА на ВИЧ велика, медики и ученые, занимающиеся исследованием самого страшного недуга двадцать первого столетия, считают, что с ее помощью можно отсеять только здоровых людей. То есть тех, у кого ИФА на ВИЧ не показал плюс.
Итак, какими могут быть результаты иммуноферментного анализа, и что следует делать пациенту при их получении:
ИФА на ВИЧ отрицательный. Это может говорить о том, что человек здоров. Отсутствие антител в сыворотке или плазме крови пациента свидетельствует о том, что в его организме нет вируса иммунодефицита. Следует помнить, что судить об этом можно лишь в том случае, если с момента предполагаемого инфицирования прошло минимум пять недель. А в некоторых случаях и больше. Если в анализе на ВИЧ ИФА отрицательно, но инфицирование могло произойти, например, при употреблении инъекционных наркотиков или незащищенном половом акте с непроверенным партнером, то заражение, все же, возможно. И проверку лучше провести через определенный промежуток времени. Ведь то, насколько быстро вирус иммунодефицита даст о себе знать, напрямую зависит от состояния иммунной системы и от количества, в котором инфекция попала в организм. Медицине известны случаи, когда вирус обнаруживался более чем через полгода после инфицирования. Поэтому достоверность ИФА на ВИЧ через 3-4-6 месяцев в определенных случаях остается под вопросом. Если же иммуноферментный анализ показал отрицательный результат, а симптомы вируса иммунодефицита у человека проявляются, речь идет о тошноте и рвоте, диарее, ломоте в суставах и конечностях, а также повышении температуры тела, проверку произвести следует повторно. Возможно, анализ был проведен слишком рано или произошла ошибка.
Анализ на ВИЧ ИФА положительный. Это может говорить о возможном инфицировании. Именно возможном, поскольку на основании иммуноферментного анализа выводы о наличии у человека вируса иммунодефицита не делают. Если ИФА на ВИЧ отрицательный, что это значит? Это значит, что человек здоров. Но положительный результат не всегда значит, что пациент, проходивший исследование болен. Ведь выработка тел в организме возможна и в некоторых других случаях. Достоверность ИФА на ВИЧ высока. Так почему же на основании положительного результата невозможна постановка диагноза? Дело в том, что иммуноферментный анализ – это первичная диагностика. Поэтому человека с положительным результатом отправляют на повторное исследование с применением более чувствительных методов.
Сомнительный ИФА на ВИЧ свидетельствует о том, что при диагностике могла быть допущена ошибка. Произойти это может и в государственном и в частном медицинском учреждении. Сотрудники поликлиник, лабораторий и коммерческих организаций – люди, и им свойственно ошибаться. В редких случаях путаница может произойти по причине того, что ими могут быть перепутаны маркеры или сами результаты. Достоверность ИФА на ВИЧ через 6 недель составляет девяносто восемь – девяносто девять процентов. Однако в случае, если симптомы и проявления вируса иммунодефицита имеются, а результат оказался отрицательным, врач может счесть его сомнительным и направить пациента на повторное исследование. Это может быть иммуноферментный анализ, иммунный блоттинг или проверка по ЦИТО.
ИФА на ВИЧ положительный, иммуноблот положительный или отрицательный: о чем говорят результаты проверки двумя методами?
Достоверность ИФА на ВИЧ 4 поколения высока. Однако перед постановкой диагноза пациента направляют еще и на иммунный блоттинг. Это необходимо для того, чтобы выяснить, вступают ли антитела, которые были выявлены при иммуноферментном анализе в стойкую реакцию с антигенами.
Если ИФА на ВИЧ положительный, а иммуноблот отрицательный, значит, инфицирование не подтверждено. В этом случае пациента направляют на дополнительную диагностику, чтобы выяснить, почему в организме производится выработка антител и производится ли она вообще.
Если же иммуноблоттинг положительный и таким же является иммуноферментный анализ, то пациенту ставят диагноз вирус иммунодефицита. После этого его направляют к терапевту или иммунологу.
Если ИФА на ВИЧ отрицательный через 6 недель, но сомнения, все же, есть, больного направят на иммунный блоттинг. Точность этих исследований одинакова. И погрешность есть и у иммуноферментного анализа и у иммунного блоттинга.
Если ИФА-анализ на ВИЧ, точность которого велика, окажется отрицательным, а иммунный блоттинг положительным, то пациенту также будет поставлен страшный диагноз.
